Urea agar Base acc. to CHRISTENSEN (Merck 1.08492)
ISO 6579, USDA ve DIN Norm 10160 ile USDA yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde üre testi ile mikroorganizma tanımlanmasında kullanılan katı besiyeridir.
Urea agar Base Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .
Bileşim
Peptone from meat 1,0 g/L; D(+) Glucose 1,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; KH2PO4 2,0 g/L; Phenol red 0,012 g/L; Agar-agar 12,0 g/L
Etki şekli
Üre, urease enzimi ile CO2 ve amonyağa parçalanır. Oluşan amonyak pH'yı yükseltir ve sonuçta pH indikatörü aracılığı ile renk kırmızıdan sarı-pembeye döner. Besiyerinin yüzeyine yoğun bir sürme yapılır. İnkübasyon 35 oC'da 5-48 saat sürer. Aşılama yoğunluğu ve enzim aktivitesine bağlı olarak pozitif sonuçlar 5 saat sonunda alınabilir. Bu test için 1 tüpün aşılanmadan kontrol olarak bırakılması, 1 tüpün Proteus spp ile (pozitif şahit) ve 1 tüpün de E. coli (negatif şahit) ile aşılanması önerilir.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 21,0 g/L olacak şekilde ısıtılarak damıtık suda eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika süre ile sterilize edilir. Otoklav sonrası 45 oC'a soğutulup, üzerine 50 mL/L hesabıyla filtre ile sterilize edilmiş %40 üre çözeltisi eklenir, karıştırılır ve steril tüplere 7'şer mL dağıtılıp, dip kısmı yaklaşık 2,5 cm olacak şekilde yatık agar hazırlanır. Hazırlanmış besiyeri berrak ve kırmızı renklidir. pH'sı 25 oC'da 6,8±0,2'dir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden (üre ilave edilmiş halde), 25,0 L besiyeri (3571 adet tüp/7 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test mikroorganizmaları | Gelişme | Renk |
Escherichia coli ATCC 25922 | iyi/ çok iyi | sarı |
Shigella flexneri ATCC 12022 | iyi/ çok iyi | sarı |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | iyi/ çok iyi | sarı |
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 | iyi/ çok iyi | kırmızı |
Proteus vulgaris ATCC 13315 | iyi/ çok iyi | kırmızı |
Proteus mirabilis ATCC 14153 | iyi/ çok iyi | kırmızı |
Morganella morganii ATCC 25830 | iyi/ çok iyi | kırmızı |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
Urea agar Base acc. to CHRISTENSEN | 1.08492.0500 | 500 g |
Urea | 1.08487.1000 | 1000 g |
Kaynaklar
Bundesgesundheitsamt: Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 35 LMBG − Beuth Verlag Berlin, Köln
Christensen, W.B.: Urea decomposition as means of differentiating Proteus and Paracolon cultures from each other and from Salmonella and Shigella types. − J. Bact., 52, 461-466 (1946).
Cook, G.T.: Urease and other biochemical reactions of the Proteus group. - J. Path. Bact., 60; 171-181 (1948).
Deutsches Institut für Normung (DIN): Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen − Nachweis von Salmonellen (Referenzverfahren) - DIN 10160.
International Organization for Standardization (ISO): Detection of salmonellae (Reference method) − International Standard 6579 (1993).
Jeffries, C.D.: Urease activity of intact and disrupted bacteria. - Arch. Path., 77; 544-547 (1964).
Stuart, C.A., Van Stratum, E., a. Rustigian, R.: Further studies on urease production by Proteus and related organisms. − J. Bact., 49; 437-444 (1945).
Thal, E., a. Chen, T.H.: Two simple tests for the differentiation of plague and pseudotuberculosis bacilli. − J. Bact., 69; 103-104 (1955).