Levine EMB Agar (Merck 1.03857)
Eosin Methylene-blue Lactose Agar acc. to Levine
AOAC, BAM, COMPF, SMD ve USP yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde E. coli ve diğer Enterobacter türlerinin izolasyon ve ayrımı ile Candida albicans 'ın hızlı tanımlanması için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.
Levine EMB Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .
Bileşim
Peptone 10,0 g/L; Lactose 10,0 g/L; K2HPO4 2,0 g/L; Eosin yellowish 0,4 g/L; Methylene blue 0,065 g/L; Agar-agar 13,5 g/L
Etki şekli
Bileşimdeki boyalar, pek çok Gram pozitif bakterinin gelişimini baskılar. Koagülaz pozitif stafilokoklar karakteristik renksiz ve toplu iğne başı büyüklüğünde koloni oluşturarak gelişirler ve bunlara koagülaz testi uygulanabilir. Koliform grup bakteri analizinde yayma ya da sürme ile inoküle edilen Petri kutuları aerobik olarak 35 oC'da 1-2 gün inkübe edilirken, Candida analizi %10 CO2 atmosferinde yapılır.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 36,0 g/L olacak şekilde damıtık suda ısıtılarak eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika süre ile sterilize edilir ve 45-50 oC'a soğuduğunda steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Hazırlanmış besiyeri berrak ve kahve-kırmızı renklidir, pH'sı 25 oC'da 7,0±0,2'dir. Candida ile çalışılacağında otoklav sonrası besiyerine 0,1 mg/L olacak şekilde tetracycline hydrochloride ilave edilir. Bu koşulda besiyeri rengi mavi olur. Candida analizlerinde inkübasyonun %10 CO2 atmosferinde Anaerocult C ya da Anaerocult C mini) yapılması önerilir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 13,8 L (1111 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Tanımlama
Koloni görüntüsü | Mikroorganizma |
2-3 mm çaplı, metalik yeşil parıltılı, koyu ve siyah merkezli | Escherichia coli |
4-6 mm çaplı, gri-kahverengi merkezli | Enterobacter |
Saydam, amber renkli | Salmonella ve Shigella |
Renksiz, toplu iğne başı büyüklüğünde | Koagülaz pozitif stafilokoklar |
Örümceğimsi ya da tüylü gibi | Candida albicans |
Maya gibi, yuvarlak ve düz | Diğer Candida türleri, bazen Nocardia |
Kalite Kontrol
Test mikroorganizmaları | Gelişme | Koloni |
Mavi | Metalik Parlaklık |
Escherichia coli ATCC 25922 | iyi/ çok iyi | + | + |
Escherichia coli ATCC 11775 | iyi/ çok iyi | + | + |
Escherichia coli 194 | iyi/ çok iyi | + | + |
Enterobacter cloacae ATCC 13047 | iyi/ çok iyi | soluk | − |
Shigella sonnei ATCC 11060 | iyi/ çok iyi | − | − |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | iyi/ çok iyi | − | − |
Proteus mirabilis ATCC 14273 | iyi/ çok iyi | − | − |
Staphylococcus aureus | zayıf | − | − |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No. | Ambalaj |
Levine EMB Agar | 1.01342.0500 | 500 g |
Anaerobic jar * | 1.16387.0001 | 1 adet |
Anaeroclip * | 1.14226.0001 | 25 adet |
Anaerocult C * | 1.16275.0001 | 10 adet |
Anaerocult C mini * | 1.13682.0001 | 25 adet |
Petri Sepeti * | 1.07040.0001 | 1 adet |
Tetracycline hydrochloride* |
|
|
* : Candida analizi için gereklidir.
Kaynaklar
American Public Health Association, American Water Works Association and Water Pollution Control Federation: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th ed., Washington 1998. Levine, M.: Differentiation of E. coli and A. aerogenes on a simplified eosin-methylene blue agar. - J. Infect. Dis., 23; 43-47 (1918). Levine, M.: Bacteria fermenting lactose and the significance in water analysis. - Bull., 62; Iowa State College Engr. Exp. Station (1921). Menolasino, N.I., Grieves, B., a Payne, P.: Isolation and Identification of coagulase-positive staphylococci on Levine's eosin-methylene blue agar. - J. Lab. Clin. Med., 56 (6); 908-910 (1960). Vogel, R.A., a. Moses, M.R.: Welds method for the rapid identification of Candida albicans in clinical materials. - Am. J. Clin. Path., 28 (1); 103-106 (1957). Weld, J.T.: Candida albicans. Rapid identification in pure cultures with carbon dioxide on modified eosin-methylene blue medium. - Arch. Dermat. Syph., 66; 691-694 (1952). Weld, J.T.: Candida albicans. Rapid identification in cultures made directly from human materials. - Arch. Dermat. Syph., 67 (5); 473-478 (1953). United States Pharmacopeia XXVI, Chapter "Microbial Limit Tests", 1985. |  |
Escherichia coli ATCC 11775 |