MYP Agar (Mannitol-Egg-yolk-Polymyxine Agar) (Merck 1.05267)

Cereus Selective Agar acc. to Mossel

DIN-Norm 10198 ile AOAC, BAM ve ISO yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde Bacillus cereus aranması ve sayımı için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.

Bileşim

Peptone from casein 10,0 g/L; Meat extract 1,0 g/L; D(-) Mannitol 10,0 g/L; NaCl 10,0 g/L Phenol red 0,025 g/L; Agar-agar 12,0 g/L

Etki şekli

Besiyeri selektif katkısında bulunan polimiksin (Merck 1.09875) refakatçi florayı baskılarken bu konsantrasyon B. cereus üzerinde olumsuz etki yapmaz. Eğer analiz edilecek gıdada refakatçi flora varlığı beklenmiyor ise veya bu floranın az sayıda olduğu tahmin ediliyor ise polimiksin kullanılması zorunlu değildir. B. cereus, mannitol negatif olduğu için refakatçi flora içindeki mannitol pozitif olanlardan rahatlıkla ayrılır. B. cereus mannitolü kullanamadığı için kırmızı koloni oluştururken mannitol pozitif olanların koloni rengi sarı/pembedir. Besiyeri bileşimindeki yumurta sarısı ise B. cereus 'un lesitinaz aktivitesi ile belirlenmesini sağlar. B. cereus lesitinaz pozitif olduğu için kolonileri etrafında beyaz bir presipitasyon meydana gelir. Çoğu B. cereus suşunda bu reaksiyon 18 saat gibi kısa bir süre içinde belirgin olarak izlenir.

Hazırlanması

B. cereus sayılmasında kullanılan bu besiyerinin hazırlanması diğer pek çok besiyeri hazırlanmasına göre katkıların ilavesi açısından farklılık gösterir. Bu besiyeri hazırlandıktan sonra ancak 3-4 gün depolanabilir. Bu nedenle 1 litre değil genellikle 500 mL olarak (40 Petri) hazırlanır. Cereus Selektif Agar katkısı (Merck 1.09875) 500 mL besiyeri için 1 şişe olarak hazırlanmıştır. Ancak steril yumurta sarısı emülsiyonu (Merck 1.03784) 100 mL şişe içinde olup bu miktar 1 litre besiyeri için kullanılır. Bu durumda 450 mL olarak hazırlanan bazal besiyerine 100 mL'lik steril yumurta sarısı emülsiyonundan aseptik koşullar altında 50 mL'sinin alınıp bazal besiyerine ilave edilmesi gerekir.

Besiyerinin hazırlanması için 450 mL damıtık su içinde 21,5 g dehidre besiyeri ısıtılarak eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. Su banyosunda 45-50 oC'a soğutulup üzerine 50 mL steril yumurta sarısı emülsiyonu ile 1 şişe B. cereus selektif katkısı ilave edilir ve karıştırılarak standart Petri kutularına 12,5'er mL ya da 14 cm çaplı büyük Petri kutularına 50'şer mL dökülür. Hazırlanmış besiyeri yumurta sarısı nedeni ile bulanık ve hafif portakal renklidir. 25 oC'da pH'sı 7,2±0,2'dir.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı

500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden (katkılar ilave edilmiş olmak üzere) 11,6 L besiyeri (930 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.

Kalite Kontrol (spiral plater yöntemi)

Ürün Bilgileri

Kaynaklar

Brown, E.R., Moody, M.D., Treece, E.L., a. Smith, C.W.: Differenzial diagnosis of Bacillus cereus, Bacillus anthracis and Bacillus cereus var. mycoides. − J. Bact., 75; 499-509 (1958).

Donovan, K.O.: A selective medium for Bacillus cereus in milk. − J. Appl. Bact., 21; 100-103 (1958).

Inal, T.; Vergleichende Untersuchungen über die Selektivmedien zum qualitativen und quantitativen Nachweis von Bacillus cereus in Lebensmitteln.

I. Mitteilung. − Fleischwirtsch. 51; 1629-1632 (1971).

IV. Mitteilung. − Fleischwirtsch. 52; 1160-1162 (1972).

Bundesgesundheitsamt: Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 35 LMBG. − Beuth Verlag Berlin, Köln.

DIN Deutsches Institut für Normierung e.V.: DIN 10198 Teil 1 und 2.

Mossel, D.A.A., Koopmann, M.J., a. Jongerius, E.: Enumeration of Bacillus cereus in foods. − Appl. Microbiol., 15; 650-653 (1967).

Nygren: Phospholipase C-producing bacteria and food poisoning. An experimental study on Clostridium perfringens and Bacillus cereus. − Acta path. microbiol. scand., 56; Suppl. 1-160 (1962).

Bacillus cereus ATCC 11778	Staphylococcus aureus ATCC 6538