Lysine Iron Agar (Merck 1.11640)

AOAC, BAM ve SMWW yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde biyokimyasal tanımlama için kullanılan katı besiyeridir.

Lysine Iron Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .

Bileşim

Peptone from meat 5,0 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; D(+) Glucose 1,0 g/L; L-Lysine monohydrochloride 10,0 g/L; Sodium thiosulfate 0,04 g/L; Ammonium iron(III) citrate 0,5 g/L; Bromocresol purple 0,02 g/L; Agar-agar 12,5 g/L;

Etki şekli

Besiyeri bileşimindeki Lisin, LDC pozitif bakteriler (Salmonella) tarafından kadeverine çevrilir. Bu reaksiyon pH indikatörünün menekşe renk almasına neden olur. Reaksiyon pH 6'dan daha düşük asit ortamda gerçekleşir. Bu nedenle önce glikoz fermantasyonu sonucu ortam asitlenir. Dolayısı ile bu besiyeri glikozu fermente edebilen bakterilerin LDC enzimi varlığını belirlemek için kullanılabilir. LDC enzimi olmayan bakterilerde besiyeri rengi sarı olarak kalır, ancak inkübasyonun uzaması halinde alkalinizasyon gerçekleşerek sahte pozitif sonuçlar alınabilir. Bu nedenle inkübasyon süresi 24 saati geçmemelidir. Birkaç Proteus morganii suşu hariç olmak üzere Proteus ve Providencia ise lisini α-ketocarboxylic asit oluşacak şekilde deamine eder. Bu bileşik ise yüzeyin hemen altında oksijen etkisi ile demirle reaksiyona girerek kırmızımsı kahverengi bir bileşik oluşturur. Hidrojen sülfür oluşumu dipte siyah renk ile belirlenir.

Hazırlanması

Dehidre besiyeri, 32,0 g/L olacak şekilde damıtık su içinde kaynar su banyosunda 5-10 dakika tutularak ve sürekli karıştırılarak ya da mikrodalga fırın kullanılarak besiyerinin iyice erimesi sağlanır. Besiyeri henüz sıvı halde iken 16 X 160 mm tüplere 7'şer mL olarak dağıtılır ve tüpler 121 °C 'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav çıkışında besiyeri henüz sıvı iken tüpler 1-1,5 cm yüksekliğinde bir çubuğa yatırılır. Tüpler bu şekilde bekletilir, besiyeri katılaştıktan sonra yüzeye sürme ve aşı iğnesi ile dibe daldırma yapılır. Bu şekilde tüpün dibinde 2-2,5 cm yüksekliğinde bir besiyeri kalınlığı olmalıdır. Hazırlanmış besiyeri berrak ve menekşe renkli olup, 25 °C 'da pH'sı 6,7±0,2'dir.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 °C 'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı

500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 15,6 L besiyeri (2232 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.

Biyokimyasal tanımlama

* Lysine decarboxylase oluşturmayan (dip: sarı, yatık yüzey: menekşe) Salmonella Paratyphi A hariç

Kalite Kontrol

Ürün Bilgileri

Kaynaklar

Edwards, P.R., a. Fife, M.A.: Lysine iron agar in the detection of Arizona cultures. - Appl. Microbiol., 9; 478-480 (1961). Ewing, W.H., Davin, B.R., a. Edwards, P.R.: The decarboxylase reactions of Enterobacteriaceae and their value in taxonomy. - Publ. Hlth. Lab., 18; 77-83 (1960). Henner, S., Kleih, W., Schneiderhan, M., Burow, H., Friess, H., Grandjean, C.: Reihenuntersuchungen an Rind- und Schweinefleisch auf Salmonellen. - Fleischwirtsch., 62; 322-323 (1982). Johnson, J.G., Kunz, L.J., Barron, W., a. Ewing, W.H.: Biochemical differentiation of the Enterobacteriaceae with the aid of Lysine-iron-Agar. - Appl. Microbiol., 14; 212-217 (1966). Rappold, H., a. Bolderdijk, R.F.: Modified lysine iron agar for isolation of Salmonella from food. - Appl. Environ. Microbiol., 38; 162-163 (1979). Thatcher, F.S., a. Clark, D.S.: Microorganisms in Food (University of Toronto Press. 1968). Timms, L.: Arizona infection in turkeys in Great Britain. - Med. Lab. Techn., 28; 150-156 (1971).
	Citrobacter freundii ATCC 8090	Morganella morganii ATCC 25830	Salmonella enteritidis NCTC 5188	Shigella flexneriATCC 12022