Lysine Iron Agar

Lysine Iron Agar (Merck 1.11640)

AOAC, BAM ve SMWW yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde biyokimyasal tanımlama için kullanılan katı besiyeridir.

Lysine Iron Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .

Bileşim

Peptone from meat 5,0 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; D(+) Glucose 1,0 g/L; L-Lysine monohydrochloride 10,0 g/L; Sodium thiosulfate 0,04 g/L; Ammonium iron(III) citrate 0,5 g/L; Bromocresol purple 0,02 g/L; Agar-agar 12,5 g/L;

Etki şekli

Besiyeri bileşimindeki Lisin, LDC pozitif bakteriler (Salmonella) tarafından kadeverine çevrilir. Bu reaksiyon pH indikatörünün menekşe renk almasına neden olur. Reaksiyon pH 6'dan daha düşük asit ortamda gerçekleşir. Bu nedenle önce glikoz fermantasyonu sonucu ortam asitlenir. Dolayısı ile bu besiyeri glikozu fermente edebilen bakterilerin LDC enzimi varlığını belirlemek için kullanılabilir. LDC enzimi olmayan bakterilerde besiyeri rengi sarı olarak kalır, ancak inkübasyonun uzaması halinde alkalinizasyon gerçekleşerek sahte pozitif sonuçlar alınabilir. Bu nedenle inkübasyon süresi 24 saati geçmemelidir. Birkaç Proteus morganii suşu hariç olmak üzere Proteus ve Providencia ise lisini α-ketocarboxylic asit oluşacak şekilde deamine eder. Bu bileşik ise yüzeyin hemen altında oksijen etkisi ile demirle reaksiyona girerek kırmızımsı kahverengi bir bileşik oluşturur. Hidrojen sülfür oluşumu dipte siyah renk ile belirlenir.

Hazırlanması

Dehidre besiyeri, 32,0 g/L olacak şekilde damıtık su içinde kaynar su banyosunda 5-10 dakika tutularak ve sürekli karıştırılarak ya da mikrodalga fırın kullanılarak besiyerinin iyice erimesi sağlanır. Besiyeri henüz sıvı halde iken 16 X 160 mm tüplere 7'şer mL olarak dağıtılır ve tüpler 121 °C 'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav çıkışında besiyeri henüz sıvı iken tüpler 1-1,5 cm yüksekliğinde bir çubuğa yatırılır. Tüpler bu şekilde bekletilir, besiyeri katılaştıktan sonra yüzeye sürme ve aşı iğnesi ile dibe daldırma yapılır. Bu şekilde tüpün dibinde 2-2,5 cm yüksekliğinde bir besiyeri kalınlığı olmalıdır. Hazırlanmış besiyeri berrak ve menekşe renkli olup, 25 °C 'da pH'sı 6,7±0,2'dir.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 °C 'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı

500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 15,6 L besiyeri (2232 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.

Biyokimyasal tanımlama

Bakteri

Dip

Yatık Yüzey

H2S

Arizona

menekşe

menekşe

+

Salmonella*

menekşe

menekşe

+

Prot. mirabilis

sarı

kırmızı-kahve

+

Prot. vulgaris

sarı

kırmızı-kahve

+

Prot. rettgeri

sarı

kırmızı-kahve

+

Prot. morganii

sarı

kırmızı-kahve

Providencia

sarı

kırmızı-kahve

Citrobacter

sarı

menekşe

+

Escherichia

sarı

menekşe

Shigella

sarı

menekşe

Klebsiella

menekşe

menekşe

* Lysine decarboxylase oluşturmayan (dip: sarı, yatık yüzey: menekşe) Salmonella Paratyphi A hariç

Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmaları

Gelişim

Dip

Yatık yüzey

Shigella flexneri ATCC 12022

iyi / çok iyi

sarı

menekşe

Escherichia coli ATCC 25922

iyi / çok iyi

sarı

menekşe

Salmonella typhimurium ATCC 14028

iyi / çok iyi

menekşe ve siyah

menekşe

Salmonella enteritidis NCTC 5188

iyi / çok iyi

menekşe ve siyah

menekşe

Citrobacter freundii ATCC 8090

iyi / çok iyi

sarı ve siyah

menekşe

Proteus mirabilis ATCC 29906

iyi / çok iyi

sarı ve siyah

kırmızımsı-kahve

Morganella morganii ATCC 25830

iyi / çok iyi

sarı

kırmızımsı-kahve/menekşe

Ürün Bilgileri

Ürün Adı

Merck Kat. No

Ambalaj

Lysine Iron Agar

1.11640.0500

500 g

Kaynaklar

Edwards, P.R., a. Fife, M.A.: Lysine iron agar in the detection of Arizona cultures. - Appl. Microbiol., 9; 478-480 (1961).

Ewing, W.H., Davin, B.R., a. Edwards, P.R.: The decarboxylase reactions of Enterobacteriaceae and their value in taxonomy. - Publ. Hlth. Lab., 18; 77-83 (1960).

Henner, S., Kleih, W., Schneiderhan, M., Burow, H., Friess, H., Grandjean, C.: Reihenuntersuchungen an Rind- und Schweinefleisch auf Salmonellen. - Fleischwirtsch., 62; 322-323 (1982).

Johnson, J.G., Kunz, L.J., Barron, W., a. Ewing, W.H.: Biochemical differentiation of the Enterobacteriaceae with the aid of Lysine-iron-Agar. - Appl. Microbiol., 14; 212-217 (1966).

Rappold, H., a. Bolderdijk, R.F.: Modified lysine iron agar for isolation of Salmonella from food. - Appl. Environ. Microbiol., 38; 162-163 (1979).

Thatcher, F.S., a. Clark, D.S.: Microorganisms in Food (University of Toronto Press. 1968).

Timms, L.: Arizona infection in turkeys in Great Britain. - Med. Lab. Techn., 28; 150-156 (1971).

Citrobacter freundii ATCC 8090

Morganella morganii ATCC 25830

Salmonella enteritidis NCTC 5188

Shigella flexneriATCC 12022


Bu sayfa 7350 kez okundu.
Sayfayı Yazdır    Adobe Acrobat Reader Adobe Acrobat Reader