DNase Test Agar (Merck 1.10449)
APHA ve ISO yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde mikrobiyel DNase test besiyeri olarak kullanılır.
Bileşim
Tryptose 20,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Deoxyribonucleic acid 2,0 g/L; Agar-agar 15,0 g/L
Etki şekli
DNAse içeren bakteriler, besiyerindeki DNA'yı hidrolize eder. İnkübasyon sonrasında besiyeri 1 N HCl (Merck 1.00317) asit ile kaplandığında DNAse poaitif olan kolonilerin etrafında berrak zonlar görülür. Stafilokoklar, mannitolü kullanarak asit oluştururlar. Besiyerine mannitol ve pH indikatörleri ilave edilerek olan mannitol negatif ve pozitif mikroorganizmaların ayırt edilmesini sağlar.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri 42,0 g/L olacak şekilde damıtık su içinde ısıtılarak eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilip 45-50 oC'a soğutulur ve steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Hazırlanmış besiyeri yanar-döner ve kahverengi olup, 25 °C'da pH'sı 7,3±0,2'dir. Besiyeri, mannitolü olarak hazırlanmak isteniyorsa otoklav öncesi 10,0 g/L mannitol ve 0,025 g/L bromothymol blue veya 0,025 g/L Phenol red ilave edilir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 11,9 L besiyeri (952 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test Mikroorganizmaları | Gelişme | Berrak zon |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | iyi/ çok iyi | + |
Staphylococcus aureus ATCC 6538 | iyi/ çok iyi | + |
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 | iyi/ çok iyi | – |
Escherichia coli ATCC 25922 | iyi/ çok iyi | – |
Serratia marcescens ATCC 14756 | iyi/ çok iyi | + |
Bacillus cereus ATCC 11778 | iyi/ çok iyi | + |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
DNase Test Agar | 1.10449.0500 | 500 g |
Bromothymol blue indicator | 1.03026.0005 | 5 g |
D(-)Mannitol | 1.05982.0500 | 500 g |
Hydrochloric acid 1 mol/L | 1.09057.1000 | 1 L |
Phenol red indicator | 1.07241.0005 | 5 g |
Kaynaklar
International Organization for Standardization: Meat and meat products - Detection and enumeration of Staphylococcus aureus (Reference methods). - Draft International Standard ISO/DIS 5551 (1977).
Jeffries, C.D., Holtmann, D.F., a. Guse, D.G.: Rapid method for determining the activity of microorganisms on nucleic acid. - J. Bact., 73; 590-591 (1957).
Schreier, J.B.: Modification of Deoxyribonuclease Test Medium for rapid identification of Serratia marcescens. - Amer. J. Clin. Pathol., 51; 711-716 (1969).
Smith, P.B., Hancock, G.A., a. Rhoden, D.L.: Improved Medium for Detecting Deoxyribonuclease-Producing Bacteria. - Appl. Microbiol., 18; 991-993 (1969).
Streitfield, M.M., Hoffmann, E.M., a. Janklow, H.M.: Evaluation of extra-cellular deoxyribonuclease activity in Pseudomonas. - J. Bact., 84; 77-80 (1962).
 |  |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Escherichia coli ATCC 25922 |