Standart şekilde hazırlanmış 100 mL Nutrient agar (Merck 1.05450) besiyerine 0,1 g Cystine ve 1 g glikoz ilave edilip sıcak su banyosunda eritilir. Sterilizasyon serbest buharda (kapağı aralık bırakılan otoklavda) 1 saat ve ilave olarak 60 ^oC 'daki su banyosunda 2 saat tutularak yapılır. Bu karışım 50 ^oC soğuduktan sonra içine % 5 oranında kan ilave edilir ve Petri kutularına dağıtılarak saklanır.