mEC Broth with Novobiocin (Merck 1.14582)
USDA-FSIS yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde özellikle et ürünlerinde E. coli O157 serotipi aranmasında selektif zenginleştirme besiyeri olarak kullanılır.
Bileşim
Peptone 20,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Bile Salts no 3 1,12 g/L; Lactose 5,0 g/L; K2HPO4 4,0 g/L; KH2PO4 1,5 g/L; Novobiocin 0,02 g/L
Etki şekli
Standart EC Broth besiyerinden farkı safra tuzlarının miktarının azaltılmış olması ve novobiosin ilave edilmiş olmasıdır. Bu nedenle standart EC Broth besiyerine novobiosin eklenerek bu besiyeri elde edilemez. Safra tuzları konsantrasyonunun azaltılmış olması nedeni E. coli O157:H7 serotipinin E. coli tip 1'e göre safra tuzlarına daha az dirençli olmasıdır.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 36,7 g/L olacak şekilde damıtık su içinde eritilir. Erlenlere ya da diğer uygun kaplara 225'er mL olacak şekilde dağıtılıp, otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonrası 25 oC'da pH'sı 6,9±0,2'dir. Hazırlanmış besiyeri berrak ve sarımsı–portakal renkte olup, 2-8 oC'da 6 ay stabilitesini korur. Novobiosin doğrudan besiyeri bileşiminde olduğu için otoklav sonrası bir katkı ilavesi söz konusu değildir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 13,6 L besiyeri hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test Mikroorganizmaları | Gelişme | Singlepath E. coli O157 |
E. coli O157:H7 ATCC 35150 | iyi | + |
E. coli ATCC 11775 | orta/ iyi | – |
Proteus vulgaris ATCC 13315 | baskılanmış | |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | baskılanmış | |
Enterococcus faecalis ATCC 33186 | baskılanmış | |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
mEC Broth with Novobiocin | 1.14582.0500 | 500 g |
CT-Supplement | 1.09202.0001 | 1 x 16 şişe |
Sorbitol-MacConkey Agar | 1.09207.0500 | 500 g |
Singlepath E.coli O157 | 1.04141.0001 | 25 test |
Kaynaklar
Okrend, A.J.G., Rose, B.E., a. Bennett, B.: A research not: A screening method for the isolation of Escherichia coli O157:H7 from ground beef. - J. Food Prot., 53; 249-252 (1990).
USDA-FSIS, Revision 4 of Laboratory Communication #38 Protocol for Isolation and Identification of Escherichia coli O157:H7. - Amelia K. Sharar and Bonnie E. Rose, (1996).