TB Medium Base acc. to Löwenstein – Jensen

TB Medium Base acc. To LÖWENSTEIN-JENSEN (Merck 1.05400)

Löwenstein – Jensen Medium

Bull. Int. (1954) ve DIN-Norm 58943 yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde tüberküloz bakterisinin belirlenmesi ve dirençliğinin analizi için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.

TB Medium Base güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .

Bileşim (g/1,6 L; hazırlanmış besiyeri için)

KH2PO4 2,5; MgSO47H2O 0,24; tri-Magnesium dicitrate 14-hydrate 0,6; L-Asparagine 3,6; Potato meal 30,0; Malachite green 0,4

Etki şekli

Besiyeri bileşimindeki maddeler, tüberküloz bakterisinin gelişimini teşvik eder. Yoğun inokülümden sonra 35 oC'da inkübasyona bırakılan tüplerde 10-14 gün sonra ve daha sonra haftalık intervallerle koloni gelişimi izlenir. Gliserol ilave edilmiş besiyerinde iyi gelişen, kabarık, kırıntılı, kuru görünümlü ve genellikle yeşilimsi koloniler Mycobacterium tuberculosis (R tipi) olarak tanımlanır. Bu üreme biçimi gliserolsüz besiyerlerinde daha zayıf olarak görülür. Mycobacterium bovinus (S tipi) ise gliserollü besiyerinde zayıf gelişir ya da gelişmez. Gliserolsüz besiyerinde düz, nemli, parlak ve renksiz koloni oluşturur.

Hazırlanması

Bu besiyerinin hazırlanması diğer pek çok besiyerinden oldukça farklıdır. Dehidre besiyeri 37,5 g/600 mL olacak şekilde damıtık su içinde çözülür, gerekirse 600 mL bazal besiyeri için 12 mL gliserol (Merck 1.04094) ilave edilip, otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. 50 oC'a soğutulup üzerine 1 litre taze yumurtadan hazırlanmış tam yumurta (sarı ve beyaz karışık) homejenizatı ilave edilir. Bu homojenizatın hazırlanmasında gereken asepsi kurallarına uyulmalıdır. Homojenizat ilave edilmeden önce 25 °C'da pH'sı 4,8±0,2 olmalıdır. Yumurta ilavesinden sonra hava kabarcıkları oluşmayacak şekilde iyice karıştırılır ve steril tüplere 7'şer mL olacak şekilde dağıtılır. Tüpler yatık olarak 85 oC'da 45 dakika doymuş su buharında (inspissator'de) tutularak koagülasyon sağlanır. Steriliteden emin olmak için bu işlem 24 saat sonra bir kez daha tekrarlanır. Hazırlanmış besiyeri bulanık ve yeşildir. Gliserofobik Mycobacterium ile çalışıldığında gliserol ilave edilmemelidir.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı

500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, (yumurta homojenizatı ilavesi ile birlikte) 21,3 L besiyeri (3047 adet tüp/7 mL) hazırlanır.

Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmaları

Gelişme

Mycobacterium tuberculosis ATCC 25177

iyi/ çok iyi

Mycobacterium fortuitum ATCC 6841

iyi/ çok iyi

Mycobacterium kansasii ATCC 12478

iyi/ çok iyi

Mycobacterium phlei ATCC 11758

iyi/ çok iyi

Mycobacterium smegmatis ATCC 14468

iyi/ çok iyi

Ürün Bilgileri

Ürün Adı

Merck Kat. No

Ambalaj

TB Medium Base acc. to

Löwenstein-Jensen

1.05400.0500

500 g

Glycerol (about 87 %)

1.04094.0500

500 mL

Kaynaklar

Bull. Intern. Un. Tuberc., 24; 102 (1954).

Cruckshank, R.A., Stewart, S.M.: Detection of resistance to streptomycin PAS and isoniazid in tubercle bacilli (Assoc. of Clin. Pathologists, broadsheet No. 32, 1961).

DIN Deutsches Institut für Normung e.V.: Tuberkulosediagnostik, Modifiziertes Löwenstein-Jensen-Kulturmedium für Anzüchtung von Tuberkulosebakterien - DIN 58943.

Jensen, K.A.: Reinzüchtung und Typenbestimmung von Tuberkelbazillenstämmen. - Zbl. Bakt. I. Orig., 125; 222-239 (1932).

Löwenstein, E.: Die Züchtung der Tuberkelbazillen aus dem strömenden Blute. - Zbl. Bakt. I. Orig., 120; 127-129 (1931).


Bu sayfa 3109 kez okundu.
Sayfayı Yazdır    Adobe Acrobat Reader Adobe Acrobat Reader