TSC Agar (Tryptose Sulfite Cyclocerine Agar) Base (Merck 1.11972)
ISO 7937 ve AOAC ile APHA yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde Clostridium perfringens aranması ve sayımı için selektif katı besiyeri olarak kullanılır. TSC Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .
Bileşim
Tryptose 15,0 g/L; Peptone from soymeal 5,0 g/L; Yeast extract 5,0 g/L; Sodium disulfite 1,0 g/L; Ammonium iron(III) citrate 1,0 g/L; Agar-agar 15,0 g/L
Etki şekli
TSC Agar bileşimindeki besin maddeleri Cl. perfringens gelişimini sağlarken hidrojen sülfür oluşumu kolonilerin siyahlaşması ile belirlenir. Sikloserin refakatçi flora gelişimini baskılar.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 42,0 g/L olacak şekilde ısıtılarak damıtık su içinde eritilir ve manyetik taş ile birlikte otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. 45-50 oC'a soğutulduktan sonra filtre ile sterilize edilmiş %5 konsantrasyondaki D-Cycloserine çözeltisinden 10 mL/L olacak şekilde ilave edilir ve steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür.
Sülfit indirgeyen Clostridium 'ların sayımı için yumurta sarısı ilavesi gerektiğinde; D-Cycloserine çözeltisine ilaveten 80 mL/L steril yumurta sarısı emülsiyonu (Merck 1.03784), otoklav sonrası 45-50 oC'a soğutulmuş bazal besiyerine ilave edilip karıştırılır ve steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür.
Hazırlanmış besiyeri berrak ve açık kahve renklidir, 25 oC'da pH'sı 7,6±0,2'dir. Sikloserin ilave edilmiş besiyeri 4 gün içinde kullanılmalıdır.
TSC Agar besiyeri, Florojenik MUP ve D-Cycloserine karışımı olan TSC Agar katkısı ( Clostridium perfringens Supplement ; Merck 1.00888) ile de hazırlanabilir. Bu koşulda floresan ışıma ile Clostridium perfringens belirlenebilir .
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 11,9 L besiyeri (952 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test Mikroorganizmaları | Gelişme | Siyah Koloni | Floresan* |
Clostridium perfringens ATCC 10543 | iyi/ çok iyi | + | + |
Clostridium perfringens ATCC 13124 | iyi/ çok iyi | + | + |
Clostridium tetani ATCC 19406 | yok/ orta | – | – |
Clostridium novyi ATCC 17861 | yok/ orta | – | – |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | yok/ zayıf | – | – |
Bacillus cereus ATCC 11778 | yok/ zayıf | – | – |
Escherichia coli ATCC 25922 | yok/ orta | – | – |
* Clostridium Katkısı kullanılarak okuma yapıldığında
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
TSC Agar, Base (Tryptose Sulfite Cycloserine Agar) | 1.11972.0500 | 500 g |
Anaerobic jar | 1.16387.0001 | 1 adet |
Anaeroclip | 1.14226.0001 | 1 x 25 |
Anaerocult A | 1.13829.0001 | 1 x 10 |
Anaerocult A mini | 1.01611.0001 | 1 x 25 |
Anaerocult P | 1.13807.0001 | 1 x 25 |
Anaerotest | 1.15112.0001 | 1 x 50 |
Clostridium perfringens Supplement | 1.00888.0001 | 16 şişe |
Petri sepeti | 1.07040.0001 | 1 adet |
UV Lamba (366 nm) | 1.13203.0001 | 1 adet |
D-Cycloserine | CN Biosciences | |
Kanamycin disulfate | CN Biosciences | |
Polymyxin-B-sulfate | CN Biosciences | |
Kaynaklar
American Public Health Association: Compendium of methods for the microbiological examination of foods. - 3rd. (1992).
DIN Deutsches Institut für Normung e.V.: Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen. Bestimmung von Clostridium perfringens. Plattenguß-Verfahren (Referenzverfahren). - DIN 10165.
Emswiler, B.S., Pierson, C.J., a. Kotula, A.W.: Comparative study of two methods for detection of Clostridium perfringens in ground beef. -Appl. Envir. Microbiol., 33; 735-737 (1977).
Harmon, S.M.: Collaborative study of an improved method for the enumeration and confirmation of Clostridium perfringens in foods. - J. AOAC, 59; 606-612 (1976).
Harmon, S.M., Kauter, D.A., a. Peeler, J.T.: Comparison of media enumeration of Clostridium perfringens. - Appl. Microbiol., 21; 922-927 (1971).
Hauschild, A.H.W., a. HILShEIMER, R.: Evaluation and modifications of media for enumeration of Clostridium perfringens. - Appl. Microbiol., 27; 78-82 (1974).
Hauschild, A.H.W., Hilsheimer, R., a. Griffith, D.W.: Enumeration of faecal Clostridium perfringens spores in egg-yolk-free Tryptose-Sulfite-Cycloserine Agar. - Appl. Microbiol., 27; 527-530 (1974).
International Organization for Standardization (ISO): Meat and meat products. - Enumeration of Clostridium perfringens (Reference method). - Working Draft ISO/TC 34/SC 6 (1978).
Orth, D.S.: Comparison of sulfite-polymyxin-sulfadiazine medium and tryptose-sulfite-cycloserine medium without eggyolk for recovering Clostridium perfringens. - Appl. Envir. Microbiol., 33; 986-988 (1977).
Shahidi, S.A., a. Ferguson, A.R.: New quantitative, qualitative and confirmatory media for rapid analysis food for Clostridium perfringens - Appl. Microbiol., 21; 500-506 (1971).
| |
Clost. perfringens ATCC 10543 | Clost. perfringens ATCC 13124 |