Blood Agar Base (Merck 1.03879)
Kanlı Agar
APHA ve BAM yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde, başta zor gelişenler olmak üzere mikroorganizmaların geliştirilmesi ve hemoliz reaksiyonlarının belirlenmesi amacıyla Kanlı Agar ve Kaynamış (Chocolate) Kanlı Agar hazırlanması için kullanılan katı besiyeridir.
Blood Agar base güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .
Bileşim
Nutrient substrate (heart extract and peptones; kalp ekstraktı ve peptonlar) 20,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Agar-agar 15,0 g/L
Etki şekli
Zengin besin içeriği pek çok mikroorganizmanın gelişimine uygundur. pH'nın 6,8 olması hemoliz reaksiyonunun belirgin olmasını sağlar. Taze defbrine koyun kanı hemoliz için en uygun olan kandır. At, sığır gibi hayvanların yerine koyun kanı kullanılmasının nedeni koyundan kan alınmasının çok kolay olmasıdır. İnsan kanı kullanılmamasının nedeni kan gruplarıdır. Adı geçen diğer hayvan kanlarında kan grubu farkı olmadığı için antijenik özellikleri yoktur. İnsan kanı kullanılması klinik mikrobiyolojide bazı sahte pozitif reaksiyonlara neden olabildiği için benimsenmemektedir. Kan bileşiminde bulunan fibrinler, kanı pıhtılaştıran faktörlerden birisidir. Besiyeri bünyesine katılacak kanın pıhtılaşmamış olması gerekir ve buna bağlı olarak kan defibrine edilir. Geçmiş dönemlerde kan, içinde cam boncuk olan tüplere alınıp, mekanik olarak fibrinlerin cam boncuk üzerinde toplanması ve dolayısı ile kanın pıhtılaşmaması sağlanırken, artık doğrudan antikoagülant içeren tüplere kan alınmaktadır.
Balgamdan tüberküloz etmeni izolasyonu için bazal besiyerine %1 gliserol ve %25 insan kanı ya da %0,1 gliserol, %2,5 insan kanı ve 100 IU/mol penisilin ilavesi önerilmektedir. Bazal besiyerine 5 mg/L gentamisin (0,1 mL gentamisin çözeltisi) ile Streptococcus pneumoniae, diğer steptokoklar, Bacteriodes, Clostridium ve maya izolasyonu için selektif bir ortam sağlanır. Aeromonas türlerinin selektif olarak geliştirilmesi için ampicillin koyun kanlı besiyeri önerilmektedir. Clostridium analizinde inkübasyon, anaerob ortamda yapılmalıdır.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri 40,0 g/L konsantrasyonda olacak şekilde ısıtılarak damıtık su içinde eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav çıkışında 45-50 oC'a soğutulur, %5 oranında defibrine koyun kanı ilave edilir, karıştırılır ve Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Bazal besiyeri berrak, sarımsı kahverengindedir ve 25 oC'da pH’sı 6,8±0,2'dir. Kan ilave edilmiş besiyeri buzdolabında en çok 3 ay depolanabilir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan bir kutu dehidre besiyerinden (%5 kan ilave edilmek üzere) 13,1 L besiyeri (1050 Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test mikroorganizmaları | Ekim (kob/mL) | % Geri kazanım | Hemoliz | Bacitracin testi |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | 103-105 | ≥ 70 | β |
|
Streptococcus pyogenes ATCC 12344 | 103-105 | ≥ 70 | β | + |
Streptococcus agalactiae ATCC 13813 | 103-105 | ≥ 70 | – |
|
Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 | 103-105 | ≥ 70 | α | – |
Listeria monocytogenes ATCC 19118 | 103-105 | ≥ 70 | – |
|
Bacillus cereus ATCC 11778 | 103-105 | ≥ 70 | β |
|
Clostridium perfringens ATCC 13124* | 103-105 | ≥ 70 | β |
|
*(anaerobik inkübasyon)
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj | Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
Blood Agar Base | 1.10886.0500 | 500 g | Anaerobic jar | 1.16387.0001 | 1 adet |
Gentamicin solution | 1.11977.0001 | 10 mL | Anaeroclip | 1.14226.0001 | 1 x 25 |
Glycerol (about 87 %) | 1.04094.0500 | 500 mL | Anaerocult A | 1.13829.0001 | 1 x 10 |
Ampicillin mono-sodium salt | CN Biosciences |
| Anaerocult P | 1.13807.0001 | 1 x 25 |
Penicillin G potassium salt | CN Biosciences |
| Anaerotest | 1.15112.0001 | 1 x 50 |
Petri kutusu sepeti | 1.07040.0001 | 1 adet | Koyun Kanı |
|
|
Anaerocult A mini | 1.01611.0001 | 1 x 25 |
|
|
|
Kaynaklar
American Public Health Association: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 3rd ed., 1992. Black, W.A. a. Van Buskirk, F.: Gentamicin blood agar used as a general-purpose selective medium. − Appl. Microbiol., 25; 905-907 (1973). Hosty, Freeman a. Irwin: Publ. Hlth. Lab., 11; 143 (1953). Mishra, S., Nair, G.B., Bhadra, R.K., Sikder, S.N., a. Pal, S.C.: Comparison of selective media for primary isolation of Aeromonas species from human and animal faeces. − J. Clin. Microbiol., 25; 2040-2043 (1987). Norton, J.F.: Bacteriology of pus. − J. Lab. Clin. Med., 17; 558-565 (1932). Sondag, J.E., Morgens, R.K., Hoppe, J.E., a. Marr, J.J.: Detection of pneumococci in respiratory secretions: clinical evaluation of gentamicin blood agar. − J. Clin. Microbiol. 5; 397-400 (1977). Tarshis, M.S., a. Frisch, A.W.: Blood media for the cultivation of Mycobacterium tuberculosis. − Amer. J. Clin. Pathol. 21; 101-113 (1951). Updyke, E.L.: Pneumococcal Infections − in Diagnostic Procedures for Bacterial, Mycotic and Parasitic Infections, 5th Edition, APHA New York 1970. |  |
Staphylococcus aureus |