Chromocult TBX Agar (Merck 1.16122)
Tryptone Bile X-glucuronide Agar
ISO 16649'e uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakteriler ve Escherichia coli aranması ve sayılması için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.
TBX Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .
Bileşim
Peptone 20,0 g/L; Bile salts no 3 1,5 g/L; X-β-D-glucuronide 0,075 g/L; Agar-agar 15,0 g/L
Etki şekli
Besiyeri bileşimindeki kromojen substrat 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-glucuronide (X-β-D-glucuronide) E. coli 'deki β-D-glucuronidase enzimi ile bu substratı 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ve β-D-glucuronide'e parçalar, sonuç olarak E. coli kolonileri mavi-yeşil renkli olarak görülür. Refakatçi flora safra tuzlarıyla baskılanır. İnkübasyonun 44 oC'da yapılması da refakatçi florayı baskılayan bir başka etkendir. İşlem görmüş gıdalarda E. coli analizi için önce 30-37 oC'da 4 saat canlandırma işleminden sonra inkübasyon sıcaklığının 44 oC'a çıkartılması ve 18-20 saat inkübasyon yapılması önerilmektedir. ISO 16649 bu besiyerinin dökme kültür yöntemi ile kullanılmasını önermektedir. Bu besiyeri membran filtrasyon tekniğinde de başarıyla kullanılmaktadır.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, 36,6 g/L olacak şekilde damıtık su içinde ısıtılarak eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilip, steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Sterilizasyon sonrası hazırlanmış besiyeri berrak ve sarımsı renktedir. 25 oC'da pH'sı 7,2±0,2'dir. Buzdolabında ve karanlıkta olmak kaydı ile 4 hafta depolanabilir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 13,6 L besiyeri (1092 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol (spiral plater yöntemi)
Test Mikroorganizmaları | Ekim (kob/mL) | % Geri kazanım | Koloni Rengi |
Escherichia coli DSMZ 502 | 103-105 | ≥ 70 | mavi-yeşil |
Citrobacter freundii ATCC 8090 | ≥ 105 | ≤ 0,01 | – |
Enterococcus faecalis ATCC 19433 | ≥ 105 | ≤ 0,01 | – |
Ürün Bilgileri
Ürün Ad | Merck Kat. No | Ambalaj |
Chromocult TBX (Tryptone Bile X-glucuronide) Agar | 1.16122.0500 | 500 g |
Cellulose-mixed-ester-GNG membrane filters | Gelman 66278 | |
Kaynaklar
International Standard ISO 16649-2: Microbiology of food and animal feeding stuffs − Horizontal method for the enumeration of presumptive Escherichia coli; Part 2: Colony-count technique at 44 °C using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-D-glucoronic acid (1999).
| |
Escherichia coli ATCC 25922 | Escherichia coli DSMZ 502 |