Fluorocult LMX Broth Modified (Merck 1.10620)
EPA yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde sularda koliform grup bakteri ve Escherichia coli aranması ve sayımı için selektif sıvı besiyeri olarak kullanılır. Koliform grup bakteriler için kullanılan benzeri diğer besiyerlerinden farkı Durham tüpü kullanılmasına gerek olmamasıdır.
Bileşim
Tryptose 5,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Sorbitol 1,0 g/L; Tryptophane 1,0 g/L; K2HPO4 2,7 g/L; KH2PO4 2,0g/L; Lauryl Sulfate Sodium Salt 0,1 g/L; X-GAL 0,08 g/L; MUG 0,05 g/L; IPTG 0,1 g/L
Etki şekli
Besiyeri bileşimde bulunan lauryl sulfate refakatçi floranın gelişimini baskılarken, fosfat tampon koliform bakterilerin hızlı gelişimini sağlar. Bu besiyerinin bileşiminde bulunan 5-bromo-4-chloro-3-indoxyl-ß-D-galactopyranoside (X-GAL), koliform grup bakteriler tarafından parçalanarak besiyerinin mavi-yeşil renk almasını sağlayan bir kromojenik substrattır. İnkübasyon sonrasında rengi mavi-yeşil olan tüpler, koliform pozitif olarak işaretlenir ve sadece bunlar 366 nm uzun dalga boylu UV el lambası (Merck 1.13203) ile loş bir ortamda kontrol edilir. Floresan ışıma görülen tüpler E. coli olarak işaretlenir.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri, tek kuvvette 17,0 g/L; çift kuvvette 34,0 g/L olacak şekilde damıtık su içinde eritilir, tüplere 10'ar mL dağıtılıp otoklavda 121 ° C'da 15 dakika sterilize edilir. Hazırlanmış besiyeri berrak ve sarı renktedir. 25 ° C'da pH'sı 6,8 ±0,2'dir. Hazırlanmış besiyeri oda sıcaklığında 6 ay depolanabilir. 15 ° C altında depolanırsa besiyeri performansını etkilemeyen bir çökelti görülebilir. Gıda analizlerinde özellikle Gram pozitif refakatçi flora yoğun ise otoklavlama öncesinde 30 mg/L konsantrasyonda novobiosin ilavesinin besiyerinin selektivitesini artıracağı belirtilmektedir.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 ° C'da depolandığında son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, tek kuvvette 29,4 L besiyeri (2941 adet tüp/10 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test Mikroorganizmalar | Mavi-yeşil renk olşumu | MUG | İndol |
Escherichia coli ATCC 25922 | + | + | + |
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 | + | – | |
Enterobacter cloacae ATCC 13047 | + | – | |
Citrobacter brakii ATCC 6750 | + | – | |
Citrobacter freundii ATCC 8090 | + | – | |
Shigella flexneri ATCC 12022 | – | | |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | – | | |
Aeromonas hydrophila ATCC 7966 | – | | |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
Fluorocult LMX Broth modified | 1.10620.0500 | 500 g |
Bactident Indole | 1.11350.0001 | 30 mL |
Kovács Indole Reagent | 1.09293.0100 | 100 mL |
UV Lamp (366 nm) | 1.13203.0001 | 1 adet |
Kaynaklar
Hahn, G., a. Wittrock, E.: Comparison of chromogenic and fluorogenic substances for differentiation of Coliforms and Escherichia coli in soft cheeses. - Acta Microbiologic Hungarica 38 (3-4); 265-271 (1991).
Manafi, M.: Schnellnachweis von Bakterien mittels fluorogener und chromogener Substrate. - Forum Städte-Hygiene 41; 181-184 (1990).
MANAFI, M.: Diagnostik von Mikroorganismen mittels fluorogener und chromogener Substrate. - Ernährung/Nutrition 15; Nr.10 (1991).
Manafi, M., Kneifel, W.: Fluorogenic and chromogenic substrates. - A promising tool in Microbiology. - Acta Microbiologica Hungarica 38 (3-4); 293-304 (1991).
Manafi, M., Kneifel, W.: Ein kombiniertes Chromogen-Fluorogen-Medium zum simultanen Nachweis der Coliformengruppe und von E.coli in Wasser. - Zbl. Hygiene und Umweltmedizin 189; 225-234 (1989).
Manafi, M., Kneifel, F., Bascon, S.: Fluorogenic and chromogenic substrates used in bacterial diagnosis. - Microbiol. Rev. 55; 335-348 (1991).
Ossmer, R.: Simultaneous Detection of Total Coliforms and E. coli - Fluorocult LMX-Broth. - 15th International Symposium/Food Micro 1993. The International Committee on Food Microbiology and Hygiene, Bingen/Rhine (1993).
 |
Ortadaki tüp floresan pozitiftir. Bu reaksiyon E. coli için tipiktir. |