PALCAM Agar (Merck 1.11755)

PALCAM Listeria Selective Agar Base acc. to VAN NETTEN et al.

ISO 11290 ile BAM yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde Listeria ssp. ve özellikle Listeria monocytogenes izolasyonu ve sayımı için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.

PALCAM Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .

Bileşim

Peptone 23,0 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; Starch 1,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Agar-agar 13,0 g/L (= Columbia Agar); D(-) Mannitol 10,0 g/L; Ammonium iron(III) citrate 0,5 g/L; Esculin 0,8 g/L; Glucose 0,5 g/L; Lithium chloride 15,0 g/L; Phenol red 0,08 g/L

Etki şekli

Besiyeri bileşimindeki antibiyotikler ve lityum klorür ile refakatçi flora olarak bulunan Gram negatiflerin ve çoğu Gram pozitiflerin inhibisyonu sağlanır. Listeria 'nın β-D-glucosidase aktivitesi eskulin ve amonyum demir (III) sitrat ile belirlenir. Eskulin β-D-glucosidase enzimi ile eskuletin ve glikoza parçalanır. Eskuletin demir (III) sitrat ile zeytin yeşili-siyah renk veren kompleks yapar. Stafilokok ve enterokok gibi mannitol pozitif bakteriler eğer inhibe olmamışlar ise sarı renkli ve sarı zonlu koloni oluştururlar. L. monocytogenes bu besiyerinde 1,5-2 mm çapında zeytin yeşili-gri renkli, bazen siyah merkezli ancak her zaman siyah zonlu koloni oluşturur.

Hazırlanması

Dehidre besiyeri, 35,9 g/500 mL olacak şekilde ısıtılarak damıtık su içinde eritilir ve içinde manyetik taş ile birlikte otoklavda 121 ^oC'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav çıkışı 45 oC'a soğutulup üzerine 1 mL steril damıtık su içinde çözülmüş 1 şişe selektif katkı ( PALCAM Listeria Selective Supplement ; Merck 1.12122) ilave edilir. Manyetik karıştırıcı ile selektif katkı homojen bir şekilde dağıtılıp steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Hazırlanmış besiyeri berrak ve kırmızı renklidir, 25 ^oC'da pH'sı 7,2±0,2'dir.

500 g olan 1 kutu besiyeri ile 6,9 L besiyeri hazırlanabilirse de, katkı kullanımı nedeni ile 13 adet 500 mL erlen (520 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanabilir.

Bununla birlikte, üzerine 1 mL steril damıtık su ilave edilmiş katkı, dondurularak depolanabilir. Ancak dondurulmuş katkı çözüldüğünde tekrar dondurulmamalıdır. Bu nedenle steril Eppendorf tüplerine 0,1'er mL dağıtılarak dondurulabilir. Böylece bir keresinde 500 mL değil 50 mL (4 Petri kutusu) PALCAM agar hazırlanmış olur. Bu koşulda 500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 556 adet Petri kutusu/12,5 mL hazırlanabilir. Fraser Broth besiyerinin de katkının ekonomik kullanılması için 4 örneğin bir arada analizi önerilmektedir.

Dolayısı ile Listeria analizinde selektif besiyeri olan PALCAM Agar'ın da 4 ve dördün katları şeklinde hazırlanması tüm analizin en ekonomik şekilde yapılmasını sağlar. Standart analiz yöntemine göre zenginleştirme aşamalarından 3 kez selektif katı besiyerine sürme yapılır. Buna göre 4 analiz beraberce yapılacağı koşulda 12 adet PALCAM Agar besiyeri hazırlanmalıdır.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 ^oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

Kalite Kontrol

Ürün Bilgileri

Kaynaklar

Van Netten, P., Perales, J., Van De Moosdijk, A., Curtis, G.D.W., a. Mossel, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. − Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).

Hammer, G., Hahn, G., Kirchhoff, H., a. Heeschen, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkäse. − Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).

Listeria innocua ATCC 33090	Listeria monocytogenes ATCC 19118