Oxford Listeria Selective Agar (Merck 1.07004)

ISO 11290 ile BAM ve IDF yönergelerine uygundur. In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde Listeria ssp. ve özellikle Listeria monocytogenes izolasyonu ve sayımı için selektif katı besiyeri olarak kullanılır.

Oxford Listeria Selective Agar güvenlik sertifikası için burayı tıklayın .

Bileşim

Peptone 23,0 g/L; Starch 1,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Agar-agar 13,0 g/L (= Columbia agar); Esculin 1,0 g/L; Ammonium iron(III) citrate 0,5 g/L; Lithium chloride 15,0 g/L.

Etki şekli

Besiyeri bileşimindeki antibiyotikler ve lityum klorür ile refakatçi flora olarak bulunan Gram negatiflerin ve çoğu Gram pozitiflerin inhibisyonu sağlanır. Listeria eskulini β-D-glucosidase enzimi ile eskuletin ve glikoza parçalanır. L. monocytogenes bu besiyerinde 2-3 mm çapında siyahımsı yeşil kahverengi siyah zonlu çökük merkezli koloni oluşturur.

Hazırlanması

Dehidre besiyeri, 29,25 g/500 mL olacak şekilde ısıtılarak damıtık su içinde eritilir ve içinde manyetik taş ile birlikte otoklavda 121 ^oC'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav çıkışı 45 ^oC'a soğutulup üzerine 1 mL steril damıtık su içinde çözülmüş 1 şişe selektif katkı ( Oxford Listeria Selective Supplement ; Merck 1.07006) ilave edilir. Manyetik karıştırıcı ile selektif katkı homojen bir şekilde dağıtılıp steril Petri kutularına 12,5'er mL dökülür. Hazırlanmış besiyeri berrak ve mavimsi kahve renklidir, 25 ^oC'da pH'sı 7,0±0,2'dir.

500 g olan 1 kutu besiyeri ile 17 adet 500 mL erlen (680 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanabilir.

Bununla birlikte, üzerine 1 mL steril damıtık su ilave edilmiş katkı, dondurularak depolanabilir. Ancak dondurulmuş katkı çözüldüğünde tekrar dondurulmamalıdır. Bu nedenle steril Eppendorf tüplerine 0,1'er mL dağıtılarak dondurulabilir. Böylece bir keresinde 500 mL değil 50 mL (4 Petri kutusu) Oxford agar hazırlanmış olur. Bu koşulda 500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 556 adet Petri kutusu/12,5 mL hazırlanabilir. Fraser Broth besiyerinin de katkının ekonomik kullanılması için 4 örneğin bir arada analizi önerilmektedir.

Dolayısı ile Listeria analizinde selektif besiyeri olan Oxford Agar'ın da 4 ve dördün katları şeklinde hazırlanması tüm analizin en ekonomik şekilde yapılmasını sağlar. Standart analiz yöntemine göre zenginleştirme aşamalarından 3 kez selektif katı besiyerine sürme yapılır. Buna göre 4 analiz beraberce yapılacağı koşulda 12 adet Oxford Agar besiyeri hazırlanmalıdır.

Dehidre besiyerinin depolanması

15-25 ^oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.

Kalite Kontrol

Ürün Bilgileri

Kaynaklar

Curtis, G.D.W., Mitchell, R.G., King, A.F., Griffin, E.J.: A selective differential medium for the isolation of Listeria monocytogenes. − Letters in Appl. Microbiol., 8; 95-98 (1989).

Listeria innocua ATCC 33090	Listeria monocytogenes ATCC 19118