Tributyrin Agar, Base (Merck 1.01957)
In vitro (canlı hücre dışında) yapılan standart mikrobiyolojik analizlerde lipolitik mikroorganizmaların sayımı ve belirlenmesi için katı besiyeri olarak kullanılır.
Bileşim
Peptone from meat 2,5 g/L; Pepton from casein 2,5 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; Agar-agar 12,0 g/L
Etki şekli
Besiyeri bileşimindeki tribütirin, bulanıklığa neden olur. Lipolitik bakterilerin tribütirinin parçalaması sonunda koloni etrafında berrak zonlar oluşur.
Hazırlanması
Dehidre besiyeri; damıtık su içinde 20,0 g/L olacak şekilde tartılır, üzerine 10 mL/L Neutral tributyrin (Glycerol tributyrate; Merck 1.01958) katılır. Isıtılarak eritilir ve otoklavda 121 oC'da 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrasında dikkatlice karıştırılarak homojen bir karışım elde edilir, 45-50 oC'a soğutulup, steril Petri kutularına 12,5'er mL/ dökülür. Hazırlanmış besiyeri bulanık ve sarımsıdır, 25 oC'da pH'sı 7,5±0,2'dir. Besiyeri katılaştığında homojen bir bulanıklık göstermelidir. Aksi halde hatalı sonuç alınabilir. Optimum koşullarda 2-3 gün inkübasyondan sonra etrafında berrak zon görülen koloniler lipolitik bakteri olarak sayılır.
Dehidre besiyerinin depolanması
15-25 oC'da ve besiyeri kutusu sıkıca kapalı tutulmak üzere, kutu açılmış olsa dahi son kullanma tarihine kadar güvenle kullanılabilir.
1 kutu ile hazırlanacak besiyeri miktarı
500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden (Neutral tributyrin ilavesi ile birlikte), 25,2 L besiyeri (2020 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazırlanır.
Kalite Kontrol
Test Mikroorganizmaları | Gelişim | Berrak zon |
Escherichia coli ATCC 25922 | iyi/ çok iyi | – |
Salmonella typhimurium ATCC 14028 | iyi/ çok iyi | – |
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | iyi/ çok iyi | + |
Staphylococcus aureus ATCC 25923 | iyi/ çok iyi | + |
Bacillus subtilis ATCC 6633 | iyi/ çok iyi | + |
Penicillium commune ATCC 10428 | zayıf/ orta | + |
Ürün Bilgileri
Ürün Adı | Merck Kat. No | Ambalaj |
Tributyrin Agar, Base | 1.01957.0500 | 500 g |
Glycerol tributyrate (Tributyrin) | 1.01958.0100 | 100 ml |
Kaynaklar
Anderson, J.A.: The use of tributyrin agar in dairy bacteriology. - Ber. 3. Int. Mikrobiol. Kongress, 3; 726-728 (1939)
El Sadek, G.M., a. Richards, T.: Nile blue, aniline blue and neutral red as indicators of lipolysis. - J. Appl. Bact., 20; 137 (1959).
Innes, A.G.: Coagulase positive Staphylococci from bulk milk supplies low in solids-notfat. - J. Appl. Bact., 19; 39-45 (1956).
Hayes, P.R.: Studies on marine flavobacteria. - J. Gen. Microbiol., 30; 1-19 (1963).
Rapp, M.: Elektive Nährmedien zum Nachweis von Lipolyten. - Milchwirtsch., 33; 493-496 (1978).
Willis, A.T.: The lipolytic activity of some clostridia. - J. Path. Bact., 80; 379-390 (1960).